Сосуд дьюара для спермы быков

ТОДОР АРБОВ, генеральный менеджер по странам Восточной Европы

ABSGlobal- мировой лидер по производству семени быков с высоким генетическим потенциалом. Ежегодный объем продаж – 12 млн. спермодоз в более чем 100 стран мира. На российский рынок компания ABSGlobal поставляет семя от проверенных по потомству быков из США и Канады. Наше представительство в России, зарегистрированное в Белгороде, – компания 000 «Генетика ПИК».

Качество замороженного семени, поставляемого на фермы, определяется племенной ценностью быка-производителя и биологическими показателями спермопродукции. Поставляемое нашей компанией семя производится с соблюдением высоких стандартов технологии и постоянно проходит строгую проверку на соответствие качеству. Однако даже самое высококачественное семя, обладающее высокой оплодотворяющей способностью, может прийти в негодность при ненадлежащем обращении или хранении.

Приводим рекомендации по эксплуатации сосудов Дьюара для хранения спермопродукции и по работе с ней.

Замороженное бычье семя может храниться неограниченно долго в жидком азоте при температуре -196оС. Критическая температура -135оС. Если она окажется выше даже на короткий промежуток времени, а затем семя снова поместят в контейнер, это может привести к необратимым повреждениям сперматозоидов. Степень повреждения зависит от длительности пребывания пайет в условиях повышенной температуры.

Эксплуатация сосудов для хранения семени

Сосуд Дьюара для хранения семени представляет собой большой металлический двустенный контейнер с вакуумной камерой для эффективной теплоизоляции, позволяющей поддерживать температуру – 180оС (температура азотных паров) даже при уровне жидкого азота 1 см. Однако такого количества азота хватит на очень короткий промежуток времени. Поэтому во избежание риска гибели семени рекомендуем своевременно пополнять жидким азотом контейнер до 1/4 от его объема. В современных сосудах с жидким азотом семя может храниться 4-9 месяцев. Инновационные технологии позволяют создать емкости с внутренними стенками из губчатого материала, способного абсорбировать жидкий азот и поддерживать температуру – 180оС за счет азотных паров. Такие сосуды более пригодны для транспортировки, поскольку не являются опасным грузом и при падении исключена утечка азота. Тем самым сохраняется необходимый температурный режим. После транспортировки сосуды можно заполнить жидким азотом и использовать для долгосрочного хранения спермопродукции.

Выемка семени из сосуда

Вынимать семя из одного сосуда и перемещать в другой следует за 10 секунд, а при высокой температуре окружающей среды или при сильном движении воздуха – за 5 секунд. В течение короткого промежутка времени сохраняется безопасный температурный режим. У соломинок объемом 0,25 мл гораздо меньший диаметр, поэтому они более чувствительны к изменениям температуры.

Процедура оттаивания

Оттаивать семя следует в теплой воде с температурой 35-37оС не менее 30 секунд. Затем соломинки следует вытереть насухо чистой салфеткой.

Удаление воздушных пузырей

Перед тем как отрезать кончик соломинки, ее надо аккуратно потрясти, чтобы воздушные пузыри переместились к запаянному концу. Это не нанесет семени никакого вреда! Если этого не сделать, будет утрачено 5% семени.

Защита от воздействия внешней среды

Во время подготовки инструмента для осеменения сперму следует предохранять от воздействия внешней среды. Несоблюдение данного требования грозит тем, что семя испытает температурный шок как от внезапного охлаждения, так и от повышения температуры. То и другое снизит его оплодотворяющую способность.

Количество спермодоз

Оттаивать надо строго определенное количество спермодоз, которыми технолог по воспроизводству может осеменить коров в течение 10 минут. Однако фактическое количество спермодоз для оттаивания следует рассчитывать с учетом расстояния от контейнера до коров, подлежащих осеменению, и квалификации технолога по воспроизводству.

Источник

Сосуды для замораживания спермы.

Стационарное хранилище для хранения замороженной спермы: ХБ – 0,5 (хранилище биологическое – 0,5 тонны), ХСЖА (хранилище стационарное для жидкого азота, тонна и более), КВ 6202 (емкость такая же). Использование этих сосудов позволяет хранить замороженную сперму без подзарядки жидким азотом около 3 месяцев. Сосуды типа СДП-6 – СДП-90 предназначены для стационарного хранения и транспортировки жидкого азота. Сосуды типа СДСТ или СДС – с более широкой горловиной.

Контейнеров малой емкости: СДС-6 – СДС-10.

Для транспортировки: используют термосы, сосуды Дьюар, СДС и другие.

Замораживают сперму в стационарном хранилище типа КВ-6202 или ХБ-0,5 в газообразном азоте при температуре -150± 20°С, на щите из нержавеющего металла толщиной 1,5-2 мм. Одновременно замораживают до 750 спермодоз. Цикл замораживания продолжается 7минут.

Уровень жидкого азота при замораживании с обдувом необходимо поддерживать на расстоянии 6-8 см до щита замораживающего устройства. При замораживании спермы без обдува щит замораживающего устройства должен касаться поверхности жидкого азота. При этом штативы с соломинками располагают в один ряд. Изменение температуры спермы и испаряющегося газообразного азота контролируют самопишущим потенциометром КСП-4 с подключенными медно-константановыми термопарами.

После замораживания соломинки со спермой помещают в пластмассовые стаканы или тубы, предварительно наполненные жидким азотом. Для сбора соломинок используют специальный собиратель с деревянной рукояткой. Его металлическую часть охлаждают в жидком азоте, затем вставляют в штатив, осторожно проводят вдоль него, в результате чего все соломинки ссыпаются в собиратель. После этого соломинки поворачивают и перекладывают в пластмассовые стаканы для хранения в стационарном хранилище.

Хранят замороженную сперму в стационарных хранилищах типа КВ-6202, ХБ-0.5 или ХБ-0,2 в пластмассовых стаканах, полностью погруженных в жидкий азот. Канистры с поднимателем стаканов заранее должны быть помещены в хранилище.

28. Техника безопасности при работе с сосудами Дьюара

1. Защитные очки, кожаные перчатки во время заливки жидкого азота.

2. В помещении вентиляция, горловину сосуда плотно не закрывают (чтобы не было повышения давления паров азота).

3. Из транспортного резервуара при заливке азота шланг спускают на дно сосуда.

4. Не наклонять лицо над горловиной сосуда.

5. Оберегать сосуд от резких толчков и ударов.

29. Порядок оттаивания спермы

Атрибуты

1. Наличие водяной бани.

2. Наличие корнцанга или пинцета.

3. Перчатки, очки.

4. Цитрат натрия.

5. Чистые пенициллиновые флаконы.

Оттаивание спермы, замороженной в виде соломинок

Соломинки бывают объемом 0,25 или 0,33 мл.

Правой рукой в перчатке открывают сосуд с жидким азотом, где хранится сперма. Левой рукой поднимают контейнер, в котором находится сперма. Поднимают крышку. В правую руку берут пинцет, бранши пинцета в течение 10 секунд охлаждают в парах жидкого азота (иначе соломинка приклеится). С помощью охлажденных браншей пинцета из пенала или алюминиевого пакета извлекают нужное количество соломинок. Их встряхивают, чтобы освободиться от излишнего количества азота. Немедленно переносят их для оттаивания в водяную баню. В том случае, если из жидкого азота по каким-то причинам извлекли соломинку со спермой другого быка, её уничтожают (обратно убирать нельзя).

Оттаивание спермы в соломинках проводят при 38 ̊С в течение 10 секунд. За это время сперма достигает температуры 0 ̊С. Соломинки вынимают, насухо протирают стерильной салфеткой. Одновременно можно оттаивать такое количество замороженной спермы (независимо от технологии), которое техник по ИО может использовать в течение 10 минут (обычно 1, иногда 2). Оттаивать лучше в горизонтальном положении, поэтому рабочие размеры водяной бани должны соответствовать длине соломинки (примерно 150 мм).

Оттаивание спермы в виде необлицованных гранул

При объеме гранулы 0,1-0,2 мл.

Стерильный пенициллиновый флакон. Цитрат натрия (2,9%). Водяная баня ёмкостью на 1 литр. Пинцет.

Правой рукой снимают крышку, левой рукой канистру выдвигают до горловины, остужают бранши пинцета, марлевый мешочек (горловину) прижимают к стенке сосуда с жидким азотом. С помощью ножниц разрезают часть мешочка, остуженными браншами пинцета извлекают гранулу.

Гранулу помещают в пенициллиновый флакон с 1 мл цитрата натрия, прогретого до + 38-40 ̊С на водяной бане (1 минута). Оттаивание происходит при 38-40 ̊С, то есть его помещают на водяную баню (удерживают в руках, покачивая, в течение 8-10 секунд, пока не исчезнет стерженек льда).

При объеме гранулы 0,5 мл.

Пенициллиновый флакон (стерильный), водяная баня, пинцет.

Правой рукой убирают крышку, канистру поднимают к горловине, остужают пинцет, вскрывают марлевый мешочек, извлекают 2 гранулы,помещают в пенициллиновый флакон, прогретый в течение 1 минуты при 38-40 ̊С. оттаивание при той же температуре в течение 8-10 секунд (на водяной бане).

Оттаивание спермы, замороженной в виде облицованных гранул

Объем гранул 0,25 или 0,33 мл.

Водяная баня, пинцет.

Остужают бранши пинцета в парах жидкого азота, подтягивают пенал, извлекают 1 гранулу. Её помещают в водяную баню (просто в воду) при 38-40 ̊С на 8-10 секунд. Если оболочка прозрачная, то после извлечения гранулы видно исчезновение стерженька льда. От остатков воды гранулу освобождают марлевой салфеткой. Затем оценивают активность каждой гранулы. Если оболочка из темного стекла, то одна гранула вскрывается, содержимое выдавливают на предметное стекло, определяют активность.

Соседние файлы в предмете [НЕСОРТИРОВАННОЕ]

• #
• #
• #
• #
• #
• #
• #
• #
• #
• #
• #

Источник

Технологии замораживания семени за последние годы очень продвинулись. Мы, в частности, поставляем замороженную спермопродукцию КРС, которая после разморозки совсем не отличается от «свежей». Однако чтобы осеменение коровы дало результат, семя сначала нужно правильно оттаять. Рассказываем, как работать с криоконсервированным семенем в соломинках.

При работе с замороженной спермопродукцией строго придерживайтесь правила: нельзя допускать преждевременного размораживания семени и замораживать его повторно.

Необходимые инструменты и материалы

Чтобы оттаять семя вам потребуется:

• специальный оттаиватель или водяная баня + термометр,
• анатомический пинцет длиной 25-30 см,
• таймер или часы с секундной стрелкой,
• термо-пенал,
• шприц для искусственного осеменения.

Инструкция по разморозке семени быков

Шаг 1. Тщательно вымойте руки, очистите и продезинфицируйте рабочую поверхность, расположите все необходимое поблизости (в частности оттаиватель должен находиться рядом с сосудом Дьюара).

Шаг 2. Убедитесь, что температура в оттаивателе / водяной бане нужная – 35-37°С.

Шаг 3. Откройте крышку сосуда Дьюара и отыщите нужную соломинку. Этот шаг распишем подробнее, он очень важен.

• Извлекать соломинку только для получения информации неправильно. Найти необходимую без риска размораживания семени позволяет работа с упаковочным листом.
• Канистру с семенем важно держать ниже горлышка сосуда Дьюара. Это предотвращает частичное размораживание других находящихся в канистре спермодоз.
• Когда ищете нужную соломинку, не поднимайте канистру надолго – максимум на 5 секунд. Если попытку требуется повторить, сделайте перерыв – опустите канистру на место на 15 секунд.

Шаг 4. Достаньте соломинку – не больше трех за один раз – из сосуда Дьюара специальным пинцетом (предварительно погрузите пинцет в жидкий азот для охлаждения). Важно сделать это очень быстро и сразу опустить соломинку в оттаиватель.

Шаг 5. Продержите семя в оттаивателе с температурой 35-37°С в течение 30 секунд. Прошедшее время контролируйте с помощью таймера.

Шаг 6. Достаньте соломинку из оттаивателя, тщательно вытрите ее чистой сухой салфеткой. Нельзя забывать, что вода опасна для семени!

Шаг 7. Поместите соломинку с размороженной спермодозой в предварительно нагретый до температуры 35-37°С шприц для искусственного осеменения. Для нагревания шприца рекомендуется использовать термо-пенал. Наденьте на шприц защитный чехол.

Шаг 8. Осеменение коровы размороженным семенем.

Важные правила

В период между разморозкой спермы и осеменением нельзя допускать резких температурных перепадов во внешней среде. Поэтому заправленный шпиц вплоть до момента использования надо держать в термо-пенале (в крайнем случае – просто ближе к телу).

С момента оттаивания температура семени в соломинке должна оставаться на том же уровне или повышаться!

Осеменение проводится в сжатые сроки. Максимальное время до осеменения для размороженной обычной спермы – 10 минут, для сексированной – 5 минут.

С одной стороны приведенные нами правила просты, с другой – их соблюдение все-таки требует определенных условий и подготовки. Если у вас с этим сложности, не страшно: компания «БулСелектСервис» не только поставляет высококачественную спермопродукцию, но и оказывает выездные услуги по искусственному осеменению коров.

Обращайтесь по телефону или через онлайн-чат на сайте!

Источник